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細胞支原體污染的原因有哪些

細胞支原體污染的原因對于生物實驗器材細胞培養(yǎng)來說，如何預防細胞的支原體污染是每一個細胞培養(yǎng)者的都會考慮的問題，據統(tǒng)計，在細胞污染原因分析中有超過60%的細胞培養(yǎng)物污染都是由支原體所引起的。那么細胞支原體污染的原因有哪些呢？細胞支原體污染的原因主要包括：1.不良操作：如操作者未穿實驗服、未戴口罩、未熏蒸操作臺等，容易引起污染。支原體一般通過難以追蹤的各種來源進入細胞培養(yǎng)物。其中包括實驗室人員、血清、細胞培養(yǎng)基、水浴鍋、振蕩培養(yǎng)箱、生物反應器、細胞培養(yǎng)瓶等。人為污染是上述污染源中...

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細胞支原體污染怎么處理

用肉眼或光學顯微鏡檢測支原體比較困難，所以支原體檢測一般會通過PCR的檢測、DNA染色、熒光標記、瓊脂平板接種等方法來實現。在支原體檢測之前，細胞應連續(xù)培養(yǎng)至少兩周，以便有時間讓低水平的污染物生長。對于測試，在取樣前至少兩三天內不應更換培養(yǎng)基。一、培養(yǎng)法在瓊脂平板/肉湯上培養(yǎng)被認為是檢測支原體的“金標準”。在這種方法中，將細胞培養(yǎng)物的上清液添加到液體或半固體培養(yǎng)基（含有支原體生長所必需的營養(yǎng)物質）中。受感染的細胞培養(yǎng)物會在液體肉湯和瓊脂平板上生長。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...

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細胞培養(yǎng)試劑選購指南

細胞生物學研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領域經常會進行細胞體外培養(yǎng)，但是很多實驗員不知道該怎么選購細胞、細胞培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)試劑，本節(jié)小編帶你初步了解一下細胞系的選擇技巧、購買細胞培養(yǎng)基應考慮的因素。一、細胞培養(yǎng)的環(huán)境條件細胞的體外培養(yǎng)需要為細胞創(chuàng)造良好的細胞的存活和增殖環(huán)境，這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和CO2水平、營養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數哺乳動物細胞的細胞培養(yǎng)的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...

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貼壁細胞傳代培養(yǎng)的基本步驟

我們知道開始培養(yǎng)的細胞不能無限期地生長，因為受限區(qū)域內的細胞數量不斷增加，營養(yǎng)物質也會被消耗，從而導致有毒的代謝產物增加，另外根據實驗或生產需要，也要對細胞進行擴大培養(yǎng)。通過去除培養(yǎng)基并將細胞轉移到新鮮的生長培養(yǎng)基和基質中，細胞獲得了新鮮的營養(yǎng)并去除了有毒代謝物，從而可以長期維持培養(yǎng)。這個過程就屬于傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的細胞密度會低于原始培養(yǎng)物中的細胞密度。當接種細胞后，細胞生長會經過滯后期、對數期，穩(wěn)定期和凋亡期。在凋亡期，細胞會因缺乏營養(yǎng)或培養(yǎng)條件不當而死亡。貼壁細胞傳代培...

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生物安全柜內HEPA 和 ULPA 過濾器的區(qū)別

過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護級別以及過濾器需要多久更換一次，這些都是購買生物安全柜時需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？生物安全柜中使用的過濾器，一般為高效微粒空氣(HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器，HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？HEPA和ULPA過濾器的結構及其工作原理從結構和化學角度來說，HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜，其中氣流（由電機驅動）攜帶有害氣體和顆...

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